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DNA純化柱,這一神秘工具如何在分子生物學實驗中大顯身手?

更新時間:2025-04-09  |  點擊率:2010

  DNA純化柱,這一神秘工具如何在分子生物學實驗中大顯身手?

 

  DNA純化柱是分子生物學實驗中的得力助手,專門用于分離和純化DNA分子。它通常由離心管和吸附柱兩部分組成,吸附柱上涂有硅膠或磁珠等特定吸附材料,能夠與DNA分子發生特異性結合。在高鹽濃度下,DNA被吸附到這些材料上,而雜質則被清洗掉。完成純化后,通過適當的洗脫緩沖液,純化的DNA就能從吸附材料上被釋放出來。

  DNA純化柱的應用廣泛,不僅可以用于質粒DNA提取、基因組DNA提取,還能快速純化PCR產物,甚至從瓊脂糖凝膠中恢復DNA鏈。它的結合能力強,能處理片段大小從65bp到10kbp的DNA,兼容多種緩沖液配方,適用于質粒小量制備、凝膠萃取和PCR清除等多種場景。

  以下是關于DNA純化柱的詳細說明:

  一、基本定義

  DNA純化柱是一種基于硅膠膜或玻璃纖維膜吸附原理的核酸提取工具,主要用于從復雜樣本中分離純化DNA/RNA‌。其核心組件包括離心管、硅膠膜/玻璃纖維膜和純化柱結構‌。

 

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  二、技術原理

  吸附機制‌

  在高鹽條件下,DNA會選擇性吸附于硅膠膜/玻璃纖維膜表面‌

  該吸附過程可逆,低鹽緩沖液可洗脫DNA‌

  分離過程‌

  裂解樣本→結合DNA→洗滌雜質→洗脫DNA‌

  通過離心力驅動液體通過膜結構‌

  三、主要結構

  組件     功能特性

  硅膠膜   核心吸附介質,孔徑0.45-2μm‌

  離心管   承受離心力,收集洗脫液‌

  制備管  連接離心管與純化柱‌

  四、性能參數

  結合能力‌:單柱可吸附45-50μg DNA‌

  片段范圍‌:有效提取65bp-10kbp片段‌

  兼容性‌:適配Qiagen/Invitrogen等品牌緩沖液‌

  五、應用場景

  分子生物學‌

  PCR產物純化‌

  質粒/基因組DNA提取‌

  診斷檢測‌

  臨床樣本核酸分離‌

  環境污染物DNA檢測‌

  六、技術優勢

  操作簡便(15分鐘內完成)‌

  純度較高(可去除99%蛋白雜質)‌

  適用于微量樣本處理‌

  (注:特殊型號如GE NAP柱采用Sephadex G-25填料,專用于寡核苷酸純化‌)

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